大腸菌群、大腸桿菌檢測時(shí),所用培養基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管(杜氏管)考察產(chǎn)氣的培養基,滅菌后,偶爾會(huì )有小氣泡留在小倒管內,導致培養基不能使用。重復滅菌不僅費時(shí),更重要的是會(huì )破壞培養基的有效成分。為了避免這類(lèi)問(wèn)題的發(fā)生,我公司實(shí)驗室根據實(shí)驗經(jīng)驗,做出以下幾種可能原因分析:
原因一:高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能完全排出
高壓鍋在滅菌過(guò)程中產(chǎn)生的最大壓力不夠,不能將小倒管內的氣體擠出,導致滅菌后任留有小氣泡。此外,高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度,也會(huì )出現類(lèi)似現象。
解決辦法:使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡,對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進(jìn)行監測。
原因二:試管塞塞得太緊
在滅菌時(shí),試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會(huì )導致試管內壓力與滅菌鍋內壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時(shí),鍋內壓力會(huì )大于試管內壓力,試管內壓力不夠,不能將小倒管內氣體排盡,就留有氣泡;當滅菌鍋降溫降壓時(shí),鍋內壓力小于管內壓力,可能會(huì )使試管塞和培養基崩出,培養基報廢。
解決辦法:改用塑料帽、不銹鋼管帽,或者與試管相匹配的硅膠塞。
原因三:小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后,一方面液體培養基要進(jìn)入小倒管,另一方面小倒管內部的空氣要被排出,如果小倒管管口太小,液體不容易進(jìn)去,里面的空氣不容易被排出,就會(huì )導致有小氣泡生成。
解決辦法:改用開(kāi)口比較大的倒管。